Predel je ena od značilnosti evkariotičnih celic, različne biokemične procese pa lahko delimo s prostorsko strukturo. Za analizo proteoma različnih organelov se lahko uporabita mikroskopija in analiza masne spektrometrije, vendar je še vedno težko neposredno uporabiti ti dve metodi za identifikacijo interaktomikov v številnih znotrajcelijskih predelih.
Da bi ugotovili interakcije v različnih predelih v človeških celicah, je 2.
Vbiotin-za opis znotrajceličnih okolij, ki jih zasedajo beljakovine v celici, se lahko uporabi odvisna metoda označevanja bližin. Tehnologija BioID na primer uporablja biotin ligazo BirA* (* pomeni mutant), ki vsebuje mutacijo mesta R118G, ki se lahko uporablja kot "vaba" za vklop s ciljnimi beljakovinami in izraženo v kultivnih celicah ali v večcelični sistem. v. Biotinilizirane beljakovine lahko nato zajamemo s streptavidinom, interakcijsko beljakovino pa lahko analiziramo z identifikacijo masne spektrometrije. Ker je povprečni premer globularne beljakovine 5-10nm, lahko polmer označevanja te tehnologije neposredno biotin označi medseobno beljakovino. Tehnologija BioID je bila trenutno uspešno uporabljena za opredelitev sestave številnih različnih proteinskih kompleksov, identifikacijo vezave membran in prostorsko organizacijo membranskih organelov.
Da bi dodatno opredelili interakcijski proteom v človeških živih celicah, so avtorji uporabili tehnologijo BioID za označevanje 234 znotrajceličnih beljakovin v 32 različnih komponentah celic kot "vaba" za ulov medsebnih beljakovin za vzpostavitev strukture organizacije beljakovin v živih človeških celicah. Vsaka beljakovina vabe bo označena z BirA*, nato pa bo vzpostavljena stabilna izrazna linija hek celic. Avtorji so s primerjavo ugotovljenih interakcijskih beljakovin z negativnim nadzorom ocenili zanesljivost ujetih faktorjev interakcij. Oceno kakovosti je opravilo skupno 192 označevalcev beljakovin kandidatk, skupaj pa je bilo ugotovljenih 35.902 interakcij. Akcijski faktor.
Če želite velik popust ali brezplačen vzorec, vas prosimo, da se obrnete na:liu@wellgreenxa.comHvala. Dovolj zalog imamo za ladjo.
